病毒分離好助手—DMi 1

猴痘，2019年底的病毒已經(jīng)肆虐2年多了，還未結(jié)束，新的一場(chǎng)潛在流行又開始若隱若現(xiàn)，這就是猴痘病毒。
猴痘是痘病毒科正痘病毒屬的一種。猴痘是一種罕見的病毒性人畜共患病（從動(dòng)物傳播給人的病毒），病人癥狀與過去在天花病人身上所觀察到的相似，但臨床嚴(yán)重程度較輕。隨著在1980年消滅了天花和隨后停止接種天花疫苗，猴痘成為最嚴(yán)重的正痘病毒。¹在非洲中部和西部地區(qū)熱帶雨林仍有猴痘散發(fā)病例。在沉寂了多年之后，在2022年初猴痘病毒再次進(jìn)入到大家的視野。具路透財(cái)經(jīng)早報(bào)報(bào)道，世界衛(wèi)生組織(WHO)周五召開緊急會(huì)議，討論最近爆發(fā)的猴痘疫情，此前歐洲公布有100多例確診或疑似病例。德國(guó)稱這是歐洲有史以來最大的猴痘疫情，至少有九個(gè)歐洲國(guó)家－比利時(shí)、法國(guó)、德國(guó)、意大利、荷蘭、葡萄牙、西班牙、瑞典和英國(guó)－以及美國(guó)、加拿大和澳大利亞報(bào)告了病例。世衛(wèi)組織稱，科學(xué)家們正在對(duì)不同病例的病毒進(jìn)行研究，看看它們是否有關(guān)聯(lián)，預(yù)計(jì)將很快提供最新消息。² 
 
而對(duì)病毒進(jìn)行研究首先需要對(duì)病毒分離，分離的常見方法是將從病人處取樣后的病毒感染宿主，其可以是動(dòng)物、雞胚或細(xì)胞株，而較之前二者的成本、生長(zhǎng)環(huán)境的復(fù)雜性和易用性，細(xì)胞株現(xiàn)在是常用的宿主。
以病毒的分離為例，將狀態(tài)良好的Vero E6和Huh-7細(xì)胞分別接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，培養(yǎng)24 h后備用。凍存的鼻/咽拭子標(biāo)本放置于冰上升溫而融化。棄96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)液，每孔加入標(biāo)本液25 μL；每個(gè)標(biāo)本分別接種2類細(xì)胞系。另外，每個(gè)細(xì)胞系設(shè)2個(gè)對(duì)照孔，每孔僅加入25 μL維持液。將接種好的細(xì)胞培養(yǎng)板于5% CO2、37 ℃培養(yǎng)箱中孵育2 h。然后棄接種的標(biāo)本液，每孔加入100 μL DMEM維持液, 放置5% CO₂、37 ℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞病變。如有細(xì)胞病變，則在80%以上細(xì)胞單層被破壞時(shí)，收取細(xì)胞培養(yǎng)物。對(duì)沒有出現(xiàn)的病變細(xì)胞，收取上清液，按類似方法盲傳2代，并對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，熒光定量RT-PCR)檢測(cè)還可以利用反轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA后進(jìn)行測(cè)序。³
在對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和感染過程中需要對(duì)活細(xì)胞的狀態(tài)快速檢驗(yàn)，確保在合適的時(shí)機(jī)進(jìn)行傳代和收獲病變的細(xì)胞。而在此用途的睿智之選就是徠卡顯微系統(tǒng)的 DMi1倒置顯微鏡。首先其可以靈活地切換S40聚光鏡（40-50mm工作距離）和S80聚光鏡（80mm工作距離）。其次，高品質(zhì)的徠卡物鏡，提供色彩鮮明的圖像。再次，深思熟慮的設(shè)計(jì)以及質(zhì)量控制元件，使用者即使面對(duì)冗長(zhǎng)的工作，仍然可以舒適地工作。在其做相襯觀察時(shí)，使 用 簡(jiǎn) 便， 只 需 輕松旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換盤，即可在10x至20x至40x相襯之間切換。無需改變相襯插板中的相襯環(huán)——PH1相襯環(huán)匹配全部三種物鏡！且智能功能使的工作流程順暢、高效，節(jié)省了時(shí)間和資源。最后，徠卡顯微系統(tǒng)的高品質(zhì)成像技術(shù)提供精準(zhǔn)的結(jié)果，降低出錯(cuò)的風(fēng)險(xiǎn)。顯微鏡的LED照明意味著低能源成本以及最小的停工時(shí)間。無需經(jīng)常更換燈泡，或等待達(dá)到合適的色溫。除了上述介紹的光學(xué)和機(jī)械設(shè)計(jì)，DMi1還有相機(jī)版本，其是圖像采集和細(xì)胞培養(yǎng)存檔的一體式解決方案。您可以在250萬或500萬像素分辨率之間選擇。機(jī)安裝在支架背面。無需額外的三目鏡筒，可獲清晰視圖及輕松進(jìn)入工作區(qū)域。使用遙控采集圖像甚至視頻。數(shù)據(jù)直接存儲(chǔ)在SD卡上，無需使用電腦。相機(jī)可連接任意HDMI顯示器，與同事或?qū)W生一起進(jìn)行討論。HDMI端口可在屏幕上提供優(yōu)質(zhì)的圖像。若需要測(cè)量和批注，提煉圖像分析，系統(tǒng)中包含用于PC的徠卡應(yīng)用套件（LAS）軟件的核心版本可以完成此項(xiàng)工作。DMi1還是在中國(guó)生產(chǎn)的具有百年德國(guó)光學(xué)傳承的產(chǎn)品，兼顧品質(zhì)和成本優(yōu)勢(shì)，為了方便臨床使用還專門有醫(yī)療器械注冊(cè)證：滬械注準(zhǔn)20202220450。
2019-2022在接連的各種高傳染力的病毒輪番上陣之時(shí)，徠卡顯微系統(tǒng)有專門的解決方案為病毒的研究保駕護(hù)航。
 

 
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