介紹徠卡熒光顯微鏡的燈泡調(diào)中和熒光觀察

    一、燈泡調(diào)中：

    （1）任選一塊標(biāo)本放在載物臺(tái)上；

    （2）轉(zhuǎn)動(dòng)鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移出光路，轉(zhuǎn)動(dòng)濾色片組轉(zhuǎn)換手輪，將紫光(V)或藍(lán)光(B)或綠光(G)激發(fā)濾色片組轉(zhuǎn)入光路，并將10X熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路；

    （3）調(diào)節(jié)粗微調(diào)手輪，將標(biāo)本像調(diào)焦清晰；

    （4）前后推動(dòng)垂直照明器右邊的聚光鏡調(diào)焦推桿，使視場(chǎng)光欄成像清晰，轉(zhuǎn)動(dòng)視場(chǎng)光欄撥桿將視場(chǎng)光欄收小，調(diào)節(jié)視場(chǎng)光欄調(diào)中螺釘使視場(chǎng)光欄居中，然后再將視場(chǎng)光欄開至較大；

    （5）轉(zhuǎn)動(dòng)鏡臂上的聚光鏡旋鈕使聚光鏡移入光路，前后調(diào)節(jié)燈箱上的聚光鏡撥桿，使汞燈的弧光在視場(chǎng)內(nèi)成像清晰；

    （6）調(diào)整燈箱上的燈泡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘，使汞燈的弧光居中；

    （7）調(diào)整反光鏡水平調(diào)節(jié)螺釘和垂直調(diào)節(jié)螺釘，使光源的反射像與汞燈的弧光分開；

    （8）轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡旋鈕把聚光鏡移出光路，此時(shí)視場(chǎng)照明均勻。

 

    二、熒光觀察：

    （1）將熒光染色標(biāo)本放到載物臺(tái)上。

    （2）將10X平場(chǎng)物鏡或40X熒光物鏡轉(zhuǎn)入光路，調(diào)節(jié)載物臺(tái)縱橫移動(dòng)手輪，將標(biāo)本移入光路。

    （3）轉(zhuǎn)動(dòng)濾光片轉(zhuǎn)換撥輪，將熒光染色標(biāo)本所需要的激發(fā)濾光片組轉(zhuǎn)入光路。激發(fā)濾光片組編號(hào)刻在濾片組轉(zhuǎn)換撥輪上。濾光片選擇正確與否，是徠卡熒光顯微鏡能否得到正確應(yīng)用的關(guān)鍵。選用濾光片時(shí)，必須遵守斯托克斯定律：激發(fā)濾光片的透射波長(zhǎng)<雙色束分離器的透射波長(zhǎng)<阻斷濾光片的透射波長(zhǎng)。由于激發(fā)濾光片、雙色束分離器和阻斷濾光片，出廠時(shí)已按其用途和本身的光學(xué)特性進(jìn)行了嚴(yán)格的組合匹配，在觀察和攝影時(shí)，只需選擇濾光片組即可。

    （4）調(diào)節(jié)粗調(diào)手輪，當(dāng)看清熒光圖像輪廓后，再用微調(diào)手輪調(diào)焦，直至看到清晰的熒光圖像。

    （5）當(dāng)需要得到較強(qiáng)的熒光圖像時(shí)，可轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡旋鈕把聚光鏡移入光路，可獲得較明亮的熒光圖像。

    （6）當(dāng)需要使用40X或100X熒光物鏡觀察時(shí)，應(yīng)在標(biāo)本和物鏡間加上甘油，油中不能有影響觀察的小泡或雜質(zhì)。使用時(shí)可使甘油慢慢浸潤一會(huì)兒，然后輕輕左右來回轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器以排除氣泡。

     徠卡熒光顯微鏡對(duì)于物質(zhì)的檢出能力是非常高的，具有放大的作用；而且對(duì)于被檢測(cè)物質(zhì)的細(xì)胞的刺激也是非常小的，可以檢測(cè)活體的染色體；還有就是可以進(jìn)行多個(gè)步驟的染色。對(duì)于熒光素的構(gòu)造觀察是非常好的，一般的顯微鏡是看不出來的。而且對(duì)于一些物質(zhì)是否有熒光，熒光是什么色調(diào)的進(jìn)行判斷，還能看出是不是抗體的熒光。此款顯微鏡對(duì)于物體的定性、定量分析都是可以測(cè)定的。